1、水的基本性質(zhì) 1個水分子(H2O)是由1個氧原子和2個氫原子彎曲鍵結(jié)而成。由于正、負電荷的中心不一致,因此屬于性分子。當2個水分子同時存在時,二者會由靜電交互作用與氫鍵結(jié)合,互相吸引并保持一定的距離。而1個水分子可以同時與4個水分子結(jié)合,形成晶體般的整齊結(jié)構(gòu)。 水分子聚合體中,由于氫鍵鍵結(jié)的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)會部分斷裂,而形成逐次移動變化的狀態(tài),因此水在整體上呈現(xiàn)液態(tài),而此結(jié)構(gòu)變化每秒可達1012次。 一般而言,水若含有適量的鈉、鉀離子及硅酸鹽等礦物質(zhì),就會覺得好喝,若含有大量殘留的鹽類,如鎂、鈣等非酸堿中性鹽類,就會覺得難喝。也就是說,所謂的水除了H2O外,還含有許多其它的成分,而這些成分的種類和含量決定了水的味道。 水易溶解鹽類,即使陰陽離子經(jīng)由靜電的交互作用,很強的結(jié)合在一起,在水中也很容易電解。這是因為,水分子可以和離子結(jié)合產(chǎn)生“水合離子”。離子的半徑很小,電荷大的離子會與水分子強力的交互作用,由水分子在離子的周圍緊密排列。這時候,陽離子會與帶負矩的氧原子相互作用,而陰離子則形成相反的結(jié)構(gòu)。 2、水中存在的雜質(zhì) 源水雜質(zhì)(共5類) A. 電解質(zhì) B. 有機物 C. 顆粒物質(zhì) D. 微生物 E. 溶解氣體 A.電解質(zhì):水中的電解質(zhì)包括可溶性無機物,有機物,以及帶電的膠體粒子。影響水的電導(dǎo)率。通常水的雜質(zhì)越多,水的電導(dǎo)率就會高。我們知道,雜質(zhì)多的水,對我們的化學(xué)分析會產(chǎn)生很不利的影響。電解質(zhì)中尤以陰陽離子為主。一般可以通過用離子色譜法或原子吸收光譜法對其進行含量測定。也可聯(lián)用質(zhì)譜法分析,對其中的位未知組分初步鑒定。 B.有機物:水中所含的有機物通常指有機酸和有機金屬化合物,測定方法通常為測定其化學(xué)耗氧量。 C.顆粒物質(zhì):泥沙、塵埃、有機物、微生物等??梢杂脤iT的顆粒測定器測定 D.微生物:細菌,浮游生物,藻類等 E.溶解氣體:N2 、O2、CL2 、CO 、CO2等,可以用氣相色譜法測定其含量 3、實驗用水所要求的純度 所謂實驗,是指對現(xiàn)象所推測的假設(shè)加以驗證的動作。假設(shè)能否被證明為真理,與假設(shè)能否具有再現(xiàn)性的結(jié)果至關(guān)重要。實驗的再現(xiàn)性除了要有良好的技巧,還受到所用化學(xué)試劑的純度和分析儀器的精密度的影響。實驗中用來配置溶液的化學(xué)試劑,及所使用的水的純度也非常重要。假設(shè)水中污染物對實驗檢測會造成影響,就必須去除這些物質(zhì)。此外,為了取得良好的再現(xiàn)性結(jié)果,使用能保持穩(wěn)定水質(zhì)的純水是必要的。 隨著實驗用的分析系統(tǒng)靈敏度的提高,對水的純度有了更高的要求。 1ppm=1mg/L 1ppb=1μg/L 1ppt=1ng/L=1μg/ml 4、水的純度的表示方法 在水中,將距離1cm的兩片表面積為1cm2大小的電加以通電,來監(jiān)測兩間的導(dǎo)電率,通過所加電壓和測得的電流能夠獲知兩間的電阻值,這個數(shù)值在水質(zhì)分析中通常被稱為電阻率或比電阻,其單位用MΩ.cm(mega ohm-centimeter)來表示。 電阻率的倒數(shù)稱為導(dǎo)電率或電導(dǎo)率,用μs/cm(micro Siemens per centimeter)來表示。 這兩個參數(shù)是表示水的純度的常用參數(shù)。 將自來水中的離子去除,會使得電阻率值升高(導(dǎo)電率降低),但并非無限制的增加,這是因為部分水分子會電離為氫離子和氫氧根離子,其電阻率值限值18.248MΩ.cm(25℃)。此外,電阻率值會隨著水的電離常數(shù)而改變,因而會受到水溫的影響。例如,25℃的超純水,其電阻值為18.2MΩ.cm,但在0℃則為84.2MΩ.cm, 100 ℃則為1.3MΩ.cm。在25 ℃附近,當溫度上升1 ℃,其電阻值將下降0.84MΩ.cm。因此,多使用補償至25 ℃的電阻率值來做衡量標準。 此外像總有機碳含量(TOC),熱源內(nèi)毒素含量,細菌含量,顆粒含量,微生物含量,總?cè)芙夤腆w含量(TDS)等也常常被用作補充說明水質(zhì)的重要參數(shù)。因此,水的純度標準通常由以上這些參數(shù)的一項或幾項來綜合說明、分級。 5、純水的分級標準 實驗室純水可分為4個常規(guī)等級:純水、去離子水、實驗室Ⅱ級純水和超純水 純水:純化水平低,通常電導(dǎo)率在1-50μs/cm之間。它可經(jīng)由單一弱堿性陰離子交換樹脂、反滲透或單次蒸餾制成。典型的應(yīng)用包括玻璃器皿的清洗、高壓滅菌器、恒溫恒濕實驗箱和清洗機用水。 去離子水:電導(dǎo)率通常在1.0-0.1μs/cm之間。通過采用含強陰離子交換樹脂的混床離子交換制成,但它有相對較高的有機物和細菌污染水平,能滿足多種需求,如清洗、制備分析標準樣、制備試劑和稀釋樣品等。 實驗室Ⅱ級純水:電導(dǎo)率<1.0μs/cm,總有機碳(TOC)含量小于50ppb以及細菌含量低于1CFU/ml。其水質(zhì)可適用于多種需求,從試劑制備和溶液稀釋,到為細胞培養(yǎng)配備營養(yǎng)液和微生物研究。這種純水可雙蒸而成,或整合RO和離子交換/EDI多種技術(shù)制成,也可以再結(jié)合吸附介質(zhì)和UV燈。 超純水:這種級別的純水在電阻率、有機物含量、顆粒和細菌含量方面接近理論上的純度限,通過離子交換、RO膜或蒸餾手段預(yù)純化,再經(jīng)過核子級離子交換精純化得到超純水。通常超純水的電阻率可達18.2MΩ-cm ,TOC<10ppb,濾除0.1μm甚至更小的顆粒,細菌含量低于1CFU/ml。超純水適合多種精密分析實驗的需求,如液相色譜(HPLC),離子色譜(IC)和離子捕獲-質(zhì)譜。少熱源超純水適用于像真核細胞培養(yǎng)等生物應(yīng)用,超濾技術(shù)通常用于去除大分子生物活性物質(zhì),如熱源(結(jié)果為<0.005IU/ml)以及無法檢測到的核酸酶和蛋白酶。 目前世界上比較通用的純水標準主要有以下幾個: 化組織,臨床病理學(xué)會(CAP)試藥級用水標準,測試和材料實驗社團組織(ASTM),臨床試驗標準委員會(NCCLS),藥學(xué)會(USP)等。同時,我國也有相應(yīng)的純水標準:中國國家電子級超純水規(guī)格GB/T11446-1997和中國國家實驗室用水規(guī)格GB6682-92等。因此市面上絕大多數(shù)的純水系統(tǒng),無論是進口的還是國產(chǎn)的,都是依據(jù)這些標準來設(shè)計流程的。 6、純水的應(yīng)用 目前純水主要應(yīng)用在兩大領(lǐng)域: 一、生命科學(xué)應(yīng)用領(lǐng)域二、分析和常規(guī)應(yīng)用領(lǐng)域 生命科學(xué)應(yīng)用方面,主要有:細菌細胞培養(yǎng),臨床生物化學(xué),電泳,電生理學(xué),酶聯(lián)免疫吸附分析,內(nèi)毒素分析,組織學(xué),水栽培,細胞免疫化學(xué),哺乳動物細胞培養(yǎng),介質(zhì)制備,微生物分析,分子生物學(xué),單克隆抗體研究,植物組織培養(yǎng),放射性免疫分析等等。 分析和常規(guī)應(yīng)用方面,主要有:蒸餾水器供水,蒸汽發(fā)生器,玻璃器皿清洗,樣本稀釋和試劑制備,超純水系統(tǒng)供水,固相萃取,普通化學(xué),電化學(xué),分光光度計,TOC分析,水質(zhì)分析,離子色譜,火焰法原子吸收,石墨爐原子吸收,液相色譜,液質(zhì)聯(lián)用(HPLC-MS),電耦合等離子光譜儀,等離子質(zhì)譜,痕量金屬檢測,氣質(zhì)聯(lián)用(GC-MS)等等. 對水的純度要求高的幾個主要應(yīng)用: 電泳:電泳用水重要的要求是生物活性物質(zhì)諸如內(nèi)毒素(通常小于0.05EU/ml),核糖核酸酶和蛋白酶(不可測定)的去除。好用電阻率18.2 MΩ-cm,TOC<10ppb,0.1μm或更小孔徑的微濾以及細菌含量低于1CFU/ml的超純水作為供水。 內(nèi)毒素分析:從分離到細胞培養(yǎng)的各種應(yīng)用領(lǐng)域用水都要求規(guī)定內(nèi)毒素指標,內(nèi)毒素大指標范圍從0.25IU/ml到0.03IU/ml。對內(nèi)毒素分析,適用少內(nèi)毒素的超純水,通常是0.05IU/ml或更小。超濾是制造少內(nèi)毒素超純水的必須手段(上通常使用MWCO為5000道爾頓的超濾膜),而且可以結(jié)合UV等進行光氧化。 石磨爐原子吸收光譜:石墨爐原子吸收與其他原子吸收光譜測定的不同之處是,其火焰爐被電子發(fā)熱石墨管或棒替代,能在元素分析中達到很高的靈敏度。石墨爐原子吸收要求*純水系統(tǒng),提供ppt級的雜質(zhì)水平,18.2 MΩ-cm的電阻率和低TOC水平。內(nèi)置監(jiān)測儀提供純度保證,終的水質(zhì)指標是由良好的預(yù)處理系統(tǒng),加上連續(xù)循環(huán)流路和純水的超純化而實現(xiàn)。 電感耦合等離子光譜儀:在電耦合等離子光譜儀應(yīng)用中,對不同元素的靈敏度明顯不同,但金屬、過渡金屬、磷和硫檢測下限都在ppb范圍內(nèi)。電耦合等離子光譜儀對水的純度要求相當嚴格,電阻率大于18 MΩ-cm的超純水是必須的,TOC的要求一般不太重要,前處理要求反滲透或離子交換。 等離子質(zhì)譜:等離子質(zhì)譜可被用于測定在ppt水平的元素。對這種靈敏的等離子質(zhì)譜分析工作,水的純度要求非常嚴格,要求水中雜質(zhì)在ppt水平,電阻率18.2 MΩ-cm和較低的TOC。終的水質(zhì)指標是由良好的預(yù)處理系統(tǒng),加上連續(xù)循環(huán)流路和純水的超純化而實現(xiàn)。 質(zhì)譜分析:質(zhì)譜能對混合物進行痕量分析,由于其高靈敏度,要求高純度的用水。所有的樣本制備和前處理,例如固相萃取都需要超純水。要求水中雜質(zhì)在ppt水平,進行有機物分析時要求電阻率18.2 MΩ-cm,非常低的TOC,一般指標小于3ppb。 痕量金屬檢測:先進的現(xiàn)代分析儀器不斷提升分析的靈敏度。痕量元素現(xiàn)在通過使用諸如等離子質(zhì)譜技術(shù),可測定在ppt和亞ppt水平的物質(zhì)。痕量分析工作需要不含可測定成分的純水,并且水質(zhì)要求適用于嚴格靈敏的等離子質(zhì)譜工作。因此,試劑,標準樣稀釋和樣本制備均需要純度高的超純水,甚至需要在無塵室中操作。 隨著科技的發(fā)展,越來越多的應(yīng)用開始要求使用純度高的超純水。 7、超純水保持佳水質(zhì)的方法 超純水取水后很容易遭到環(huán)境污染,所以使用前取水(即取即用)方式時合適的。只有把超純水與環(huán)境接觸的時間縮到短,才能夠獲得純度高的超純水。 在配置高純度的化學(xué)試劑時,盡量不要使用長時間儲桶中存放的超純水,因為儲桶經(jīng)長時間使用后,會因雜質(zhì)、微生物的污染而造成水質(zhì)的劣化,像這種水,在使用時已經(jīng)不再是超純水。純水儲桶好安裝空氣過濾器,防止環(huán)境因素造成的污染。 儲水桶請勿放置在日光直射處,水溫上升,容易造成微生物繁殖。特別是半透明儲水桶,也會因為日光通透而造成藻類繁殖。 超純水取水時一定要將初期的出水放掉,以獲得穩(wěn)定的水質(zhì)。 取水時讓超純水順著容器側(cè)壁流入,盡量不要讓氣泡產(chǎn)生,可降低空氣污染。 請不要在終端濾器后再連接軟管,使用直接取水的方式才能獲得純度高的超純水。 長時間不用純水時,應(yīng)將壓力儲水桶中的RO水全部放掉以防止污染。 超純水機若長時間不使用,再次使用時應(yīng)把初期純水充分放掉以確保水質(zhì)。 原則上,純水機應(yīng)至少每7—10天通水一次,以防止微生物污染。 超純水使用要點: 1.即取即用 2.排掉前端初期水 3.取水時避免產(chǎn)生氣泡
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